貝納特氏立克次體IGG/IGM抗體ELISA試劑盒

產(chǎn)品名稱：貝納特氏立克次體IGG/IGM抗體ELISA試劑盒，間接免疫酶法檢測(cè)IgG和IgM抗體在人血清/血漿的克氏錐蟲。96T

簡(jiǎn)介：Q熱是由貝納特氏立克次體引起的全身性疾病，可發(fā)熱、非典型肺炎、肝炎或心內(nèi)膜炎。診斷是基于血清學(xué)方法，因?yàn)閺呐R床樣本分離是困難的。C. burnetii表示，I期抗原時(shí)分離出的人類和動(dòng)物、二期抗原時(shí)分離出的細(xì)胞培養(yǎng)。
II期抗原抗體在疾病的急性期占優(yōu)勢(shì)。常用的檢測(cè)方法有補(bǔ)體結(jié)合（CF）、間接免疫熒光法（IFA）和elisa。后4-8周，IgG抗體水平檢測(cè)的zui大。IgM抗體出現(xiàn)后的第二周開始直到疾病的急性期第四個(gè)月。在這些情況下，急性感染，IgG抗體在高滴度檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)IgM也是極有可能的。在慢性期（心內(nèi)膜炎），IgM是不可檢測(cè)的。ELISA檢測(cè)具有特異性強(qiáng)、敏感性好等優(yōu)點(diǎn)，人類q熱篩查及診斷試驗(yàn)對(duì)流行病學(xué)研究具有重要意義。
 

測(cè)試原理：

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法是基于在聚苯乙烯表面吸附抗原測(cè)試的抗體反應(yīng)。未結(jié)合的免疫球蛋白被洗掉。一種標(biāo)記為抗人球蛋白的酶在第二步結(jié)合抗原抗體復(fù)合物。一個(gè)新的洗滌步驟后，結(jié)合共軛與底物溶液開發(fā)援助（TMB）呈現(xiàn)藍(lán)色的水溶性產(chǎn)品變成黃色加酸終止液后。

試劑盒的特點(diǎn)：

除洗滌液外，所有試劑都已備好使用。

血清稀釋液和結(jié)合物染色有助于該技術(shù)的性能。

樣品預(yù)稀釋是不必要的。

試劑盒內(nèi)容：

1 立克次體板: 1 96-wells plate coated with LPS antigen of Brucella abortus,strain S-99.

2 血清稀釋液: 25 ml of serum dilution solution: a blue coloured phosphate buffer containing protein stabilizers and Neolone and Bronidox. Ready to use.

3 IgG/IgM 陽(yáng)性對(duì)照: 500 µl of positive control serum containing Neolone and Bronidox.

4 IgG/IgM 切斷質(zhì)控品: 500 µl of cut off control serum containing Neolone and Bronidox.

5 IgG/IgM 陰性對(duì)照: 500 µl of negative control serum containing Neolone and Bronidox.

6 IgG/IgM 共軛: 15 ml of anti-human IgG peroxidase conjugate dilution in an orange-coloured Neolone and Bronidox-containing buffer. Ready to use.

7 TMB 底物溶液: 15 ml of substrate solution containing tetramethylbenzidine (TMB). Ready to use.

8 停止劑: 15 ml of stopping solution: 0.5 M sulphuric acid.

9 洗滌緩沖液: 50 ml of 20x washing solution: a phosphate buffer containing Tween R -20 and Proclin.

存儲(chǔ)要求：

存儲(chǔ)在2-8ºC和注意到期日期。

所需材料，但不提供：

-高精度微量5和100µL.

-八通道微電極100µL.

-ELISA板式洗滌器。

- 經(jīng)恒溫處理孵化器/水浴。

-ELISA板分光光度計(jì)，450納米測(cè)量濾波器和620納米參考濾光片。

或者，一種ELISA自動(dòng)處理器及蒸餾水。

試劑的穩(wěn)定性和操作：

在無(wú)菌條件下處理試劑以避免微生物污染物。

洗滌和加藥之間不要讓盤子干燥。

底物溶液對(duì)光敏感，請(qǐng)避免光照。如果在儲(chǔ)存期間變藍(lán)請(qǐng)丟棄。底物溶液不應(yīng)與氧化劑如漂白劑或金屬接觸。確保沒有金屬部件與基體接觸。

只使用洗滌量，血清稀釋度，共軛和TMB溶液測(cè)試所需。不要把多余的溶液倒進(jìn)瓶子里。

標(biāo)本采集與處理：

無(wú)菌采集血液必須使用靜脈穿刺技術(shù)人才。無(wú)菌或無(wú)菌技術(shù)的使用將保持標(biāo)本的完整性。

血清/血漿樣品被冷藏（2-8ºC）在收集或冷凍（20ºC）如果在7天內(nèi)完成測(cè)試，不能。樣品不應(yīng)反復(fù)冷凍和解凍。不要使用高脂血、溶血、污染樣本。含有顆粒的樣品應(yīng)通過(guò)離心澄清。該試劑盒適合于血清或血漿使用。

局限性：

1、此試劑盒用于與人血清/血漿結(jié)合使用。

2、該工具包的用戶建議仔細(xì)閱讀和理解包插入。為了獲得可靠的測(cè)試結(jié)果，必須嚴(yán)格遵守該協(xié)議。特別是，正確的樣品和試劑的加樣，隨著孵育步驟仔細(xì)清洗和時(shí)機(jī)是*的準(zhǔn)確的結(jié)果。

3、樣品的結(jié)果應(yīng)與臨床評(píng)價(jià)和其他診斷程序結(jié)合使用。隔離技術(shù)應(yīng)作出明確診斷。

4、此測(cè)試不會(huì)顯示感染部位。它并不打算取代孤立。

5、抗體水平的顯著升高并不排除感染可能性。

6、在感染過(guò)程中很早采集的樣本可能沒有檢測(cè)到IgG水平。在這種情況下，建議進(jìn)行IgM檢測(cè)，或第二次血清樣本，14至21天后，與原樣品平行測(cè)試，以確定血清轉(zhuǎn)換。

7、由于孕婦IgG在分娩前被動(dòng)地從母體傳遞到胎兒，因此必須謹(jǐn)慎地對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。IgM檢測(cè)通常是6個(gè)月以下兒童感染的有用指標(biāo)。

8、單一樣本抗體測(cè)定結(jié)果不應(yīng)用于診斷zui近感染。配對(duì)樣本（急性期和恢復(fù)期）應(yīng)同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，以尋找血清轉(zhuǎn)換或抗體水平顯著上升。

貝納特氏立克次體IGG/IGM抗體ELISA試劑盒

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