腦膜炎奈瑟菌血清群B鑒定

廣州健侖生物科技有限公司

（廣州健侖生物科技有限公司是集研制開發(fā)、銷售、服務于一體的優(yōu)良企業(yè),公司產(chǎn)品涉及臨床快速診斷試劑、食品安全檢測試劑，違禁品快速檢測，動物疾病防疫檢測試劑，免疫診斷試劑、臨床血液學和體液學檢驗試劑、微生物檢驗試劑、分子生物學檢驗試劑、臨床生化試劑、有機試劑等眾多領域，同時核心代理Panbio、FOCUS、Qiagen、IBL、CORTEZ、Fuller、Inbios、BinaxNOW、LumuQuick、日本富士、日本生研等多家有名診斷產(chǎn)品集團公司產(chǎn)品，致力于為商檢單位、疾病預防控制中心、海關出入境檢疫局、衛(wèi)生防疫單位,緝毒系統(tǒng)，戒毒中心，檢驗檢疫單位、生化企業(yè)、科研院所、醫(yī)療機構(gòu)等機構(gòu)與行業(yè)提供*、高品質(zhì)的產(chǎn)品服務。此外，本公司還開展食品、衛(wèi)生、環(huán)境、藥品等多方面的第三方檢測服務。）

【儲藏條件】

2~8℃避光保存，在標明的有效期內(nèi)使用。

【有效期】

24個月

【產(chǎn)品名稱】

通用名：腦膜炎奈瑟菌診斷血清英文名：antisera for N.meningitidis

【產(chǎn)品說明】

本套血清用于A、B、C、W、X、Y等6個常見血清QUN（serogroup）腦膜炎奈瑟菌的血清群鑒定，將相應血清群腦膜炎奈瑟菌制備滅活抗原，免疫家兔所得，血清產(chǎn)品經(jīng)免疫吸附去除了非特異性凝集成分，具有效價高，特異性強的特點。

腦膜炎奈瑟菌血清群B鑒定

【規(guī)格】

每種血清群1瓶，每瓶2ml，均為使用液。

【使用方法】

1.產(chǎn)品在使用前，由冰箱拿出，恢復溫度到室溫后使用。

2.樣品分離培養(yǎng)物，經(jīng)鏡檢和生化鑒定，確定為腦膜炎奈瑟菌后，再進行血清分群檢測，如果未能確定為腦膜炎奈瑟菌，不宜直接進行血清凝集檢測，以免產(chǎn)生假陽性結(jié)果。

3.待鑒定細菌在血平板或巧克力平板上，5% CO₂，培養(yǎng)48小時。

4.用酒精擦拭玻璃片。

5.用蠟筆或防水筆將玻璃片分為8個方格。

6. 在玻片每個方格的下半部分，用移液器加5%的福爾馬林溶液（基于生物安全目的）。

7. 用無菌或一次性10μl接種環(huán)挑取BAP平板上過夜培養(yǎng)的細菌菌落。

8. 在玻片上將細菌與5%的福爾馬林溶液混勻，混勻后的液體應該不透明，在加抗血清前應保持細菌懸液不干燥。

9. 在玻片的上方加10μl血清群特異的抗血清，同時在陰性對照側(cè)加BS或者生理鹽水。

10. 緩慢的混合細菌懸液和抗血清，使上部的抗血清和下部的細菌懸液充分混合1-2分鐘。不要做旋轉(zhuǎn)晃動，以免不同血清群的血清會相互混合污染。

11.在燈光下，黑暗背景條件下觀察結(jié)果。1-2分鐘內(nèi)呈2+及以上凝集現(xiàn)象為陽性，1-2分鐘內(nèi)呈現(xiàn)2+以下凝集現(xiàn)象為陰性。如果過了2分鐘，才發(fā)生的凝集反應按陰性處理。

【凝集反應的強度等級】

當抗血清與細菌接觸，會引起凝集反應，使細胞（細菌）凝集或呈簇，細胞（細菌）上清液變得清亮，細胞懸液濃度或使用的抗血清濃度不同，會產(chǎn)生不同的強度的凝集反應，見圖示

4+ 所有的細胞都發(fā)生凝集，細胞懸液清亮。

3+ 75%的細胞發(fā)生凝集，細胞上清略微渾濁不清。

2+ 50%的細胞發(fā)生凝集，細胞上清略微渾濁不清。

1+ 25%的細胞發(fā)生凝集，細胞上清略微渾濁不清。

+/- 少于25%的細胞發(fā)生凝集，可見有顆粒狀的成分。

0 沒有肉眼可見的凝集，上清懸液渾濁、平滑。

【血清群確定】

1. 1-2分鐘內(nèi)，出現(xiàn)3+或4+凝集為陽性反應（強陽性反應）。對于B群腦膜炎奈瑟菌來說，如果出現(xiàn)2+及以上的凝集則可認為陽性。

2. 陰性反應是+/-、1+ 或 2+（弱凝集）的凝集程度。

3. 當菌株僅與一種抗血清出現(xiàn)凝集，但和生理鹽水不凝集時才能鑒定為該種血清型。

4. 如果不能確定血清群，菌株記為不能分群腦膜炎奈瑟菌（NG）。

5. 關于不能分群腦膜炎奈瑟菌（NG）菌株。

6. 在生理鹽水中凝集，無論與任何抗血清發(fā)生強反應，都應標記為自凝菌。

7. 在生理鹽水中不自凝，和多種血清出現(xiàn)凝集，記為NG。

8. 不和生理鹽水凝集，也不和任何一個血清凝集也記作NG。

【結(jié)果難以判斷時解決方案】

腦膜炎奈瑟菌具有可變性（有莢膜與無莢膜，小菌落與大菌落，慢生長與快生長，強凝集與弱凝集），有時候很難清除解釋結(jié)果，一些建議如下：

1. 挑取同一平板上的另一個細菌克隆進行重復凝集試驗。

2. 如果玻片上的結(jié)果不明確，將試管中配置懸液，重復該試驗。

3. 加20µl抗血清直接涂于玻片上，直接加一環(huán)細菌進行混均凝集。

4. 再次培養(yǎng)，第二天進行重新試驗。

5. 如果當天的平板上有各種大小不一的菌落，每種菌落再次分離純培養(yǎng)，第二天每種菌落進行試驗。大菌落一般會有比較好的凝集反應，小菌落次之。

6. 如果試驗中的問題還是不能解決，應當和對照菌株同時進行試驗，確保試劑的正確性。

【血清質(zhì)量控制】

在對未知的菌落進行血清分群之前，應選用一套腦膜炎奈瑟菌參考菌株（A, B, C, W, X, Y）和一株可分群的腦膜炎奈瑟菌進行質(zhì)量控制檢測。操作步驟：

1. 新購進的每一批次抗血清要用參考菌株進行檢測。

2. 半年后重復質(zhì)量控制檢測

3. 如果血清管暴露于超過4℃環(huán)境，或者懷疑血清被污染時，也要對血清進行重新的質(zhì)量控制。

4. 關于血清分群和質(zhì)量控制，每一批次的抗血清需要使用所有的參考菌株進行實驗室驗證，記錄質(zhì)量控制驗證結(jié)果。

【血清質(zhì)量控制檢測結(jié)果判讀】

1. 通過質(zhì)量控制檢測

與同源性的抗原反應，1-2分鐘內(nèi)，出現(xiàn)3+或 4+程度的凝集；單一血清群的抗血清不與其他血清群的腦膜炎奈瑟菌反應，不與NG菌株凝集反應，鹽水不自凝。

2. 分群血清質(zhì)量控制檢測失敗

如果抗血清與一種或多種參考菌株凝集反應，或/和NG參考菌株反應，鹽水自凝，則血清不能使用。

【其他所需材料】

潔凈玻片、生理鹽水（0.85%的氯化鈉溶液）、5%的福爾馬林溶液、接種環(huán)或移液器。

【注意事項】

1. 本產(chǎn)品只能作為腦膜炎奈瑟菌血清型判定的輔助方法，zui終的判定需形態(tài)學、生化方法和血清學方法共同進行。

 2. 本產(chǎn)品應避免冷凍。反復凍融會使血清產(chǎn)生沉淀。

3. 本產(chǎn)品在保存過程中可能會產(chǎn)生渾濁或沉淀，這并不表示該產(chǎn)品已被污染。離心或者過膜去掉渾濁或沉淀后，可以正常使用。

4. 本產(chǎn)品含有0.1%*作為防腐劑，丟棄時需倒入下水管，并用大量的水沖洗下水管。

廣州健侖生物公司提供SSI血清產(chǎn)品，包括沙門氏菌，志賀氏菌，大腸桿菌，肺炎鏈球菌，嗜血桿菌等。并且提供德國有名血清品牌SiFin的核心血清產(chǎn)品，德國SiFin血清質(zhì)量好，實驗*，已被各高校實驗室，研究所列為推薦血清產(chǎn)品！詳情可咨詢工作人員！

我司還提供其它進口或國產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌、化妝品檢測、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

廣州健侖生物長期供應各種違禁品檢測試紙、違禁品檢測卡、違禁品檢測試劑盒、藥篩試紙、藥篩試劑盒、嗎啡檢測試劑盒、巴比妥檢測試劑盒等。檢測范圍：嗎啡、巴比妥、尼古丁、KET、mamp、MDMA、BZO、THC、MTD、BAR、MDMA、AMP、BUP、PCP、TCA、OXY、MET等等。

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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
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呼吸道合胞病毒、副流感病毒、流感病毒是引起兒童下呼吸道感

染和毛細支氣管炎的常見病毒，仍然有超過1/3的病例不能明確病

原。2005年Allander等 首先從呼吸道疾病患者的呼吸道分離出

新的細小病毒，迄今來自歐洲、北美、中東、亞洲以及非洲的數(shù)

據(jù)均發(fā)現(xiàn)，從呼吸道感染患者呼吸道分泌物中發(fā)現(xiàn)人類博卡病毒

感染。大多數(shù)的研究顯示，大約l%～8%的呼吸道標本中發(fā)現(xiàn)hBoV

，大多數(shù)來自兒童。國內(nèi)目前有l(wèi)4篇關于博卡病毒的研究文章，

證實hBoV感染是引起小兒下呼吸道感染的重要病毒病原之一，鄧

昱等 *發(fā)現(xiàn)在持續(xù)喘息的患兒呼吸道分泌物中，hBoV的陽性率

高達31%。
hBoV與其他呼吸道病毒合并感染十分常見，泰國的監(jiān)測顯示，4．

5%的肺炎顯示hBoV陽性，其中83%與副流感病毒、鼻病毒及RSV混

合感染。hBoV感染臨床表現(xiàn)以高熱、陣咳為主，實驗室檢查外周

血白細胞、C一反應蛋白、血沉和血生化指標大多正常。與RSV感

染的患兒相比，hBoV感染發(fā)熱例數(shù)相對多，但其他的臨床癥狀與

RSV相似。hBoV血清陽性提示，hBoV可能引起病毒血癥；hBoV感

染除表現(xiàn)下呼吸道癥狀外，也可引起腸道等其他相關癥狀。
隨著檢測手段的提高，有更多的新病毒被發(fā)現(xiàn)，包括與hBoV不同

的一種微小病毒PARV4、2種1Tr病毒樣病毒、2種新的KI和WU、

mimi病毒等，其流行病學及其臨床特征有待進一步研究。總之， 

目前已很清楚hMPV 是重要的病毒病原，可導致嚴重的疾病，需要

研制相關的疫苗及抗病毒的藥物以防治偏肺病毒；hCoV—NL63和

hCoV—HKU1與人類上下呼吸道感染相關，但它們的疾病負擔尚不

清楚；hBoV可能引起全身疾病的發(fā)生。隨著新病毒病原的發(fā)現(xiàn)豐

富了臨床病毒病原學的研究，為臨床病原學診斷與尋找新的抗病

毒方法提出了挑戰(zhàn)。
Respiratory syncytial virus, parainfluenza virus, influenza virus is caused by lower respiratory tract sensation in children

Common infections with bronchiolitis and bronchitis, there are still more than 1/3 of cases can not be clear disease

original. In 2005, Allander et al were first isolated from the respiratory tract of patients with respiratory diseases

The new parvovirus, so far from Europe, North America, the Middle East, Asia and Africa

It has been found that human Boca virus is found in respiratory secretions of patients with respiratory infections

infection. Most studies show that hBoV is found in about 1% to 8% of respiratory specimens

, Mostly from children. Currently, there are 14 articles on BocA virus research articles,

Confirmed hBoV infection is caused by one of the important viral pathogens in children with lower respiratory tract infection, Deng

Yu et al. First found that in patients with persistent wheezing respiratory secretions, the positive rate of hBoV

Up to 31%.
Infection with hBoV and other respiratory viruses is very common, and surveillance in Thailand shows that 4.

5% of pneumonia showed hBoV positive, of which 83% with parainfluenza, rhinovirus and RSV

Infected. Clinical manifestations of hBoV infection with high fever, cough-based, laboratory examination of the periphery

Blood leukocytes, C-reactive protein, ESR and blood biochemical markers are mostly normal. Sense with RSV

Compared with children infected with hBoV infection, the relative number of cases of fever, but other clinical symptoms and

RSV is similar. hBoV seropositive suggests that hBoV may cause viremia; hBoV flu

In addition to the performance of lower respiratory tract infection, but also can cause other symptoms such as the gut.
As detection techniques improve, more new viruses are found, including different from hBoV

Of a parvovirus PARV4, 2 kinds of 1Tr virus-like virus, two kinds of new KI and WU,

mimi virus, its epidemiology and clinical features remain to be further studied. In short,

It is now well understood that hMPV is an important viral pathogen that can cause serious illnesses and needs

Development of vaccines and antiviral drugs to control metapneumovirus; hCoV-NL63 and

hCoV-HKU1 is associated with human upper and lower respiratory tract infections, but their disease burden is not yet

Clear; hBoV may cause systemic disease. With the discovery of new viral pathogens abundance

Rich in clinical viral etiology research, for the clinical diagnosis of etiology and looking for new resistance

Poisoning methods pose challenges.