單克隆抗狂犬病

Monoclonal Anti-Rabies, FITC單克隆抗體

Monoclonal Anti-Rabies, FITC

用直接免疫熒光技術(shù)檢測狂犬病毒。單克隆抗狂犬病，F(xiàn)ITC用于印象涂片檢測（準(zhǔn)備，例如，從可疑的動物腦組織）或用直接免疫熒光技術(shù)在細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒。傳統(tǒng)的狂犬病病毒敏感的檢測以及蝙蝠相關(guān)的狂犬病病毒屬，尤其是和EBLV-2 EBLV-1

Monoclonal Anti-Rabies, FITC

Detection of rabies virus using the direct immunfluores-cence technique. Monoclonal Anti-Rabies, FITC is used for detection in impression smears (prepared, for example, from brain tissues of suspicious animals) or by virus isolation in cell cultures using the direct immunofluores- cence technique. Sensitive detection of the traditional rabies virus as well as bat-associated Lyssaviruses, especially EBLV-1 and EBLV-2

Monoclonal Anti-Rabies, FITC單克隆抗體

單克隆抗體(MAb)與抗血清(又稱多克隆抗體，PAb)zui主要的區(qū)別是MAb為單一種B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的一種均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B細(xì)胞克隆的標(biāo)志，是一種*型的抗體，它的特異性是針對一個抗原決定簇的。制備單克隆抗體不能用化學(xué)分離的方法從多克隆抗體中去分離純化得到它，而是用分離產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞克隆的方法得到它。為了使B細(xì)胞克隆能在體外人工培養(yǎng)下長期存活并產(chǎn)生*均一的MAb，G．KÖhler合Milstein于1975年創(chuàng)立了雜交瘤方法。所以制備單克隆抗體的技術(shù)又稱雜交瘤技術(shù)(hybredoma technique)。

雜交瘤技術(shù)的基本原理是用分泌抗體但不能長期培養(yǎng)的B細(xì)胞與能在體外長期培養(yǎng)并可低溫保存的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交。篩選得到的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)該是既能分泌抗體又有瘤細(xì)胞的特性，可長期傳代培養(yǎng)，又可在液氮中保存的細(xì)胞。把這些細(xì)胞單克隆化，用單克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行單克隆抗體的生產(chǎn)。

The most important difference between the monoclonal antibody (MAb) and the antiserum (also called the polyclonal antibody, PAb) is that MAb is a homogeneous immunoglobulin produced by a single B cell clone. Therefore, MAb is a marker of B cell clone, and is a unique type of antibody. Its specificity is directed against an antigenic determinant. The preparation of monoclonal antibodies can not be separated and purified from polyclonal antibody by chemical separation, but it is obtained by the method of cloning the B cell that separates the antibody. In order to make B cell clones capable of long-term survival in vitro and produce a fully homogeneous MAb, G.KÖ hler and Milstein established a hybridoma method in 1975. Therefore, the preparation of monoclonal antibodies is also known as hybridoma technology (hybredoma technique).

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單抗制品即為單克隆抗體（Monoclonal antibody，簡稱McAb）制品，其由雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)，單克隆抗體其制品純度高、專一性強(qiáng)、效價高，使用時可免除不同細(xì)胞及微生物種或株間血清學(xué)上的交叉反應(yīng)，大大提高了診斷的特異性及敏感性。

制備過程

1. 免疫動物

免疫動物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性BALB/c小鼠，按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射。 抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官，刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆，使其活化、增殖，并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞。

2.細(xì)胞融合

采用二氧化碳?xì)怏w處死小鼠，無菌操作取出脾臟，在平皿內(nèi)擠壓研磨，制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合，并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各種淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合，形成雜交瘤細(xì)胞。