微生物基因組 DNA 提取試劑盒50次

Microbial Genomic DNA Extraction Kit

（適合從革蘭氏陽性細(xì)菌，酵母和絲狀真菌中提取基因組 DNA）

1試劑盒組成50 (50 次)
2 ml Collection Tube 50
Buffer KB (Column solution) 15 ml
Buffer KSL2 ( lysis solution) 2 x 30 ml
Buffer KBL1 (Lysis solution) 2 x 30 ml
Buffer KW1 (Wash solution) 50 ml
Buffer KW (Wash solution ) 使用前加入 50 ml 無水乙醇
Buffer KE (Elution solution) 15 ml

2儲存條件 
本試劑盒在室溫（15-25 ℃）下可保存一年。

微生物基因組 DNA 提取試劑盒50次
產(chǎn)品特點(diǎn)：
健侖TM Microbial Genomic DNA Extraction Kit 采用*的疏水膜
技術(shù)，高效去除菌體蛋白和 RNA 等各種干擾物，提取高純度的 DNA。試劑
盒采用*的緩沖系統(tǒng)，可從包括革蘭氏陽性細(xì)菌，酵母和絲狀真菌等所有
的微生物樣品中快速提取基因組 DNA。
注意事項：
1. 實驗前準(zhǔn)備工作：在實驗開始前，詳細(xì)閱讀該手冊熟悉各步驟，并
準(zhǔn)備好所有的試劑盒組分，1.5 ml 和 2 ml 滅菌離心管，以及 37 ℃和 65 ℃
的溫浴條件。
2. KBL1, KSL2 和 KW1 在低溫時可能產(chǎn)生混濁或沉淀，在 37-65 ℃溫
浴片刻即可。
3. Buffer KW *次使用前請按瓶上標(biāo)簽加入 50 ml 無水乙醇,并放置
在室溫保存。每次使用后，請立即擰緊蓋子。
操作步驟： 
（一）平衡吸附柱 
1. 取一 TM Mini Column 柱裝在一個 2 ml 收集管上（已備）。
加入 300 μl Buffer KB 平衡液至柱子內(nèi)，室溫 13 000 rpm 離心 1 min，使平
衡液*流過柱子。棄收集管中的濾液，將空柱套回收集管內(nèi)。
注意：柱子不平衡，將導(dǎo)致 DNA 產(chǎn)率減少。
（二）樣品處理
2. 液氮研磨: 取 50 - 500 mg 新鮮菌體，加入少量液氮，迅速研磨，
待菌體磨碎，再加少量液氮，再研磨，如此三次。將樣品迅速轉(zhuǎn)入 2 ml 離
心管，加入 600-1000 μl Buffer KSL2，混勻 2-3 次, 靜置 2 min。然后 13,000 
rpm,常溫離心，5 min。
注意：液氮研磨不充分或不用液氮將導(dǎo)致 DNA 產(chǎn)量減少或無 DNA。
3. 小心將上清液轉(zhuǎn)至干凈的 2ml 離心管，加入 1.0-1.5 倍體積的異丙醇，
混勻， 13,000 rpm, 3 min, 離心棄去去上清; 保留沉淀。在沉淀中加入 100μl
KE,*溶解,然后加入 1000-1500 μl KBL1，13,000 rpm, 2 min，上清液待轉(zhuǎn)
移。

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